目前，藥物性肝損傷（drug-induced liver injury,DILI）越來(lái)越引起人們重視。在美國(guó)，藥物性肝損傷是導(dǎo)致急性肝功能衰竭的首要原因，為之而設(shè)立的藥物性肝損傷研究網(wǎng)絡(luò)（DILIN）旨在探索一種用以診斷、評(píng)估藥物性肝損傷的標(biāo)準(zhǔn)化方案。近日，美國(guó)**衛(wèi)生院相關(guān)工作組總結(jié)出一個(gè)包括臨床特征在內(nèi)的、用以診斷藥物性肝損傷的框架圖，有助于減少高危潛在肝毒性藥物的暴露，提高患者的安全性。

    藥物性肝損傷的基因?qū)W研究

    藥物主要在肝臟代謝，長(zhǎng)久以來(lái)，藥物代謝酶是藥物性肝損傷研究的重要靶點(diǎn)。

    1. 藥物代謝酶

    細(xì)胞色素P450

    細(xì)胞色素P450（cytochrome P450 proteins,CYP）是肝臟藥物Ⅰ相代謝的主要酶類。與藥物性肝損傷相關(guān)的CYP主要有CYP1A2、CYP2A6、CYP2D6、CYP2E1和CYP3A4等。如果這些酶類出現(xiàn)遺傳多態(tài)性，則使原藥或其中間代謝產(chǎn)物造成積累，從而導(dǎo)致藥物性肝損傷的發(fā)生。

    尿核苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶

    遺傳缺陷疾病及抗驚厥藥物可致尿核苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶（uridine diphosphate glucuronosyltransferases,UGT）活性降低。Gilbert's綜合征患者服用對(duì)乙酰胺基酚后，肝損害的易感性增加。此外，苯巴比妥和苯妥英可抑制UGT活性，并可作為CYP的誘導(dǎo)劑，促進(jìn)毒性代謝產(chǎn)物N-乙酰醌亞胺（NAPQI）的生成。

    N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2

    一些藥物及其中間體（如異煙肼）需N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2代謝解毒。若該酶發(fā)生遺傳多態(tài)性，將會(huì)導(dǎo)致藥物性肝損傷發(fā)生。

    谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶

    谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶（glutathione S-transferase,GST）是一種重要的Ⅱ相藥物代謝酶，通常作為結(jié)合酶起雙重作用，在藥物Ⅰ相代謝過(guò)程中通過(guò)"中和"效應(yīng)避免肝損傷，同時(shí)參與肝臟解毒功能的下游機(jī)制。GSTT1-GSTM1空白基因型的患者，在應(yīng)用抗菌藥、非甾體類抗炎藥、抗結(jié)核藥物、曲格列酮以及他克林等藥物時(shí)，發(fā)生藥物性肝損傷的風(fēng)險(xiǎn)顯著增加。

    以胰島素增敏劑噻唑烷酮類的曲格列酮為例，該藥在臨床試驗(yàn)2 510例患者中ALT>3倍正常值上限（ULN）發(fā)生率為1.9%,安慰劑組為0.6%,治療組12例ALT≥10×ULN,5例≥20×ULN,而安慰劑組為0,這實(shí)際上已為上市后提供了可預(yù)測(cè)的不良事件。曲格列酮所致的藥物性肝損傷中，CYP2C19*2等位基因變異占46%.以后又發(fā)現(xiàn)這些患者Ⅱ相代謝酶GST也存在遺傳多態(tài)性，GSTT1和GST1M兩基因缺陷，與ALT和AST升高密切相關(guān)。

    2. 人類白細(xì)胞抗原

    6號(hào)染色體上高變異的人類白細(xì)胞抗原（human leukocyte antigen,HLA）與免疫反應(yīng)密切相關(guān)，它在藥物基因?qū)W的研究中具有特殊意義。特異性HLA基因型與阿莫西林-克拉維斯所致肝損傷強(qiáng)相關(guān)，從而成為藥物性肝損傷研究的重要靶點(diǎn)之一。一項(xiàng)研究顯示，HLA-DRB1*1501位點(diǎn)與膽汁淤積型藥物性肝損傷強(qiáng)相關(guān)，但引起肝損傷易感性增加的確切機(jī)制有待探索。

    3. 線粒體氧應(yīng)激相關(guān)酶

    線粒體超氧化物歧化酶（superoxide dismutase 2,SOD2）主要用于清除線粒體的超氧化物，但其基因變異可增加抗結(jié)核藥物致肝毒性的易感性，谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（Glutathione peroxidase 1,GPX1）可抑制線粒體氧應(yīng)激的產(chǎn)生，同樣由于其基因多態(tài)性，抑制作用大大降低。

    4. 跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白

    藥物及其代謝產(chǎn)物通常不是通過(guò)被動(dòng)擴(kuò)散的方式穿過(guò)肝細(xì)胞膜，而是通過(guò)頂端或小管膜上的特定藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體出入肝細(xì)胞。典型的基側(cè)膜的轉(zhuǎn)運(yùn)體包括有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)體和有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)多肽家族；具有代表性的流入膽汁的轉(zhuǎn)運(yùn)體包括小管轉(zhuǎn)運(yùn)體多耐藥相關(guān)蛋白2（MRP2）、乳腺癌抗癌蛋白和多耐藥糖蛋白1（MDR-1）和膽鹽輸出泵（BSEP）等。大多數(shù)導(dǎo)致膽汁淤積的藥物都有幾個(gè)屬于轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ATP結(jié)合盒（**）超家族，存在于肝小管表面。環(huán)孢菌素、易福平、雌二醇直接或間接抑制BSEP蛋白、MRP2和MDR3.轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的基因變異不僅可導(dǎo)致肝臟疾病，而且可誘導(dǎo)特異性藥物介導(dǎo)的轉(zhuǎn)運(yùn)損傷，形成個(gè)體易感性。

    線粒體損傷機(jī)制

    Kaplwitz認(rèn)為藥物性肝損傷發(fā)病機(jī)制的3個(gè)主要連續(xù)步驟為：①藥物及其代謝產(chǎn)物首先引起直接的細(xì)胞應(yīng)激（內(nèi)源性途徑）；②觸發(fā)免疫反應(yīng)（外源性途徑）；③直接損傷線粒體功能，同時(shí)可能直接導(dǎo)致線粒體膜通透性的改變，觸發(fā)細(xì)胞凋亡或壞死。

    耐受性、適應(yīng)性和易感性

    在繼續(xù)應(yīng)用肝損害藥物的情況下，由藥物引起的血清ALT水平升高多數(shù)仍可消退。血清ALT水平的短暫升高可反應(yīng)某種藥物的確可引起肝損傷，但其后在繼續(xù)應(yīng)用這種藥物的情況下，肝臟可能已產(chǎn)生"適應(yīng)性"改變，而不出現(xiàn)明顯損傷。

    一項(xiàng)研究觀察了機(jī)體對(duì)異煙肼等藥物引起的藥物性肝損傷的適應(yīng)性。在某精神病醫(yī)院的一次肺結(jié)核暴發(fā)之后，201例結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)陽(yáng)性的男性患者開(kāi)始預(yù)防性服用異煙肼。研究者每月收集患者及107例皮試陰性且未服用異煙肼的居住在相同條件下的患者的血清標(biāo)本，連續(xù)一年。結(jié)果顯示，在治療期間有3例患者血清ALT水平升高達(dá)[15~30]×ULN,伴血清總膽紅素升高（>3 mg/dL）。盡管繼續(xù)異煙肼治療，但每例患者的血清指標(biāo)異常均恢復(fù)到基線水平，提示對(duì)異煙肼產(chǎn)生適應(yīng)性耐受。作者由此推論：上述現(xiàn)象提示這樣一種可能，進(jìn)展為臨床藥物性肝炎的患者，其肝臟未能適應(yīng)或產(chǎn)生足夠的修復(fù)機(jī)制，以應(yīng)對(duì)異煙肼的刺激。潛在的適應(yīng)機(jī)制包括肝酶表達(dá)和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的改變，以及免疫機(jī)制。

    關(guān)于Hy's法則

    符合Hy's法則包括以下三個(gè)方面：①藥物可導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷，通常表現(xiàn)為ALT和AST升高>3ULN或更高；②在轉(zhuǎn)氨酶升高>3×ULN患者中，少數(shù)會(huì)表現(xiàn)出血清總膽紅素>2×ULN,這些患者無(wú)膽道阻塞的證據(jù)，無(wú)膽囊或膽道疾病引起的指堿性磷酸酶增高，亦無(wú)腫瘤、吉爾伯特綜合征或使用阿扎那韋等導(dǎo)致的糖脂化作用受損；③沒(méi)有其他可以解釋轉(zhuǎn)氨酶和膽紅素同時(shí)升高的原因，比如甲、乙、丙型病毒性肝炎，酒精或自身免疫性肝炎，或是服用另外可導(dǎo)致肝損傷的藥物。

    在臨床試驗(yàn)中若發(fā)現(xiàn)1例屬于Hy's法則的不良反應(yīng)是令人擔(dān)憂的，如果出現(xiàn)2例則強(qiáng)烈提示該藥在擴(kuò)大人群的應(yīng)用中可能引起嚴(yán)重的藥物性肝損傷.

    藥物性肝損傷生物學(xué)標(biāo)志物

    英國(guó)愛(ài)丁堡皇家醫(yī)院的研究人員對(duì)對(duì)乙酰胺基酚過(guò)量所致的藥物性肝損傷患者監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)，以下生物學(xué)標(biāo)志物的升高可識(shí)別對(duì)乙酰胺基酚過(guò)量的藥物性肝損傷患者以及ALT在正常范圍內(nèi)患者的急性肝損傷的后續(xù)進(jìn)展：肝細(xì)胞損傷分子標(biāo)志物microRNA-122,壞死性分子標(biāo)志物如高遷移性組合蛋白1（HMGB1）和半胱天冬酶裂解角蛋白18（K18），以及線粒體功能障礙分子標(biāo)志物谷氨酸脫氫酶（GLDH）。這些生物學(xué)標(biāo)志物的臨床開(kāi)發(fā)有助于提高藥物性肝損傷的臨床決策速度。

    藥物性肝損傷診斷新理念

    2011年，國(guó)際嚴(yán)重不良反應(yīng)協(xié)會(huì)（iSAEC）組織專家工作組對(duì)藥物性肝損傷的臨床表型統(tǒng)一分類進(jìn)行討論，并頒布了藥物性肝損傷標(biāo)準(zhǔn)化命名的國(guó)際共識(shí)。在藥物性肝損傷臨床生化指標(biāo)的閾值上，將ALT值提高到5×ULN以上。這樣可將不重要的自限性藥物相關(guān)事件和NASH等排除，低水平閾值也易導(dǎo)致不必要的檢查和不恰當(dāng)?shù)耐Ｋ帯SAEC定義了符合以下任何一條，可達(dá)到藥物性肝損傷生化學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)：①ALT水平≥5倍ULN;②ALP水平≥2×ULN,特別是伴有5'核苷酸酶或GGT升高，但沒(méi)有骨病者；③ALT水平≥3×ULN,同時(shí)總膽紅素≥2×ULN.

    藥物性肝損傷治療藥物

    N-乙酰半胱氨酸（N-acetyl cysteine,NAC）為小分子單肽，具有脂溶性特性，易進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用（如清除自由基），其所含的巰基代謝產(chǎn)物可刺激還原型谷胱甘肽合成，提高非酶抗氧化物水平。大量的基礎(chǔ)研究提示，NAC作用的靶細(xì)胞主要包括肝臟的肝細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、庫(kù)普弗細(xì)胞以及紅細(xì)胞、肺泡上皮細(xì)胞，這也可部分解釋為何其臨床上可用于呼吸系統(tǒng)疾病和相關(guān)肝病的治療。

    2011年，NAC作為唯一被FDA批準(zhǔn)用于治療對(duì)乙酰胺基酚中毒引起肝功能衰竭的藥物，在同年美國(guó)肝病研究協(xié)會(huì)（AASLD）發(fā)布的急性肝功能衰竭（ALF）診療指南中被推薦。此外，NAC可用于毒蕈所致的ALF的治療。2012年，歐洲肝病研究協(xié)會(huì)（EASL）關(guān)于酒精性肝病的臨床實(shí)踐指南提出，NAC和皮質(zhì)類固醇具有協(xié)同效應(yīng)，推薦兩藥聯(lián)用可改善重度酒精性肝炎患者1個(gè)月生存率，并可能降低肝腎綜合征和感染的發(fā)生。